E-64

制备注意事项

E-64可溶于水。 可以在水中制备20mg / ml溶液（可能需要加热）。 建议的储备溶液是1mM水溶液。 用作蛋白酶抑制剂的有效浓度为1至10μM。 含水原液在-20℃下稳定数月。 稀释的溶液在中性pH下稳定数天。 E-64在pH 2-10下稳定，但在氨或HCl中不稳定。 E-64也可溶于DMSO，可在干燥的DMSO中制备10mM溶液并储存在-20℃。 随后在培养基中稀释。 通过将E-64溶解在0.9％氯化钠或最少量的饱和碳酸氢钠中，然后用0.9％氯化钠稀释（用乙酸调节pH至7.0）来制备注射用溶液。

应用

E-64是半胱氨酸蛋白酶亲和纯化的有效配体。 当与硫醇化亲和基质偶联时，结合不再是不可逆的，而是保留了特异性。

生物化学/生理学行为

E-64是一种不可逆的，有效的，高选择性的半胱氨酸蛋白酶抑制剂。 E-64不与非蛋白酶的功能性硫醇基团反应，例如L-乳酸脱氢酶或肌酸激酶。 E-64不会像其他半胱氨酸蛋白酶抑制剂，leupeptin和antipain那样抑制丝氨酸蛋白酶（胰蛋白酶除外）。 E-64的反式环氧琥珀酰基（活性部分）不可逆地结合许多半胱氨酸蛋白酶中的活性硫醇基团，例如木瓜蛋白酶，猕猴桃酶和组织蛋白酶B，H和L，以形成硫醚键。 E-64是一种非常有用的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，用于体内研究，因为它具有特异性抑制作用，在细胞和组织中具有渗透性和低毒性。