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S19表面活性剂TWEEN 20

Braveds
概述

Tween 20(聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸单酯)是一种非离子型表面活性剂,属于聚山梨酯(Polysorbate)家族,具有温和的去污性、低溶血性及优异的蛋白稳定能力。其分子结构中的亲水聚氧乙烯链与疏水月桂酸链平衡(HLB≈16.7),使其在体外诊断试剂中广泛用于封闭非特异性结合、稳定生物分子及优化反应体系。

 

作用机制

温和去污性:选择性裂解细胞膜或溶解脂质,释放目标分析物(如抗原、酶),同时保留蛋白天然构象。

封闭非特异性结合:阻断固相载体(如硝酸纤维素膜、微孔板)的非特异性吸附位点,降低背景干扰(如ELISA、层析试纸条)。

稳定蛋白与胶体颗粒:通过疏水链吸附至乳胶/胶体金表面,亲水链形成保护层,防止聚集(如免疫比浊法中的信号稳定性)。

低溶血性:相比其他聚山梨酯类(Tween 80溶血性最低),Tween 20溶血风险可控,适配全血/血清样本处理。

复性抗原表位:恢复部分变性抗原的天然构象,提升抗体识别效率(如Western Blot膜再生)。

 

应用场景

ELISA洗涤/封闭液:添加至洗涤液或封闭液,减少非特异性结合,提高信噪比。

免疫层析试纸条:预混于结合垫处理液,稳定胶体金标记抗体,抑制非特异性吸附。

细胞裂解液:作为温和去污剂,裂解细胞膜释放胞内靶标(如酶、核酸),保留蛋白活性。

乳胶颗粒稳定剂:加入乳胶微球悬浮液,防止颗粒聚集,提升浊度信号均一性(如CRP、PCT检测)。

蛋白复性缓冲液:用于Western Blot膜再生,恢复抗原表位,增强抗体结合效率。

 

通用使用范围:0.01%–1.0%(诊断试剂中常用0.05%–0.2%)。

 

注意事项

稳定性与储存:避免高温灭菌:高压灭菌可能导致降解,建议过滤除菌(0.22 μm滤膜)。

避光冷藏:长期暴露于光/热可能氧化变黄(轻微变色不影响功能)。

兼容性限制:避免与强氧化剂/重金属盐混合:如高浓度过硫酸铵、硫酸铜,可能引发分解或沉淀。

慎用防腐剂:可能降低苯扎氯铵、硫柳汞等防腐剂活性,需验证有效性。

溶血风险控制:全血检测中建议浓度≤0.1%,或替换为Tween 80(溶血性更低)。

 

常见问题

检测背景升高:可能是Tween 20浓度过高或封闭不足;建议降低至0.05%-0.1%,或增加封闭剂(如BSA)。

乳胶颗粒聚集:可能是与阳离子缓冲液反应;建议替换为中性/阴离子缓冲体系(如Tris-HCl)。

试剂浑浊或沉淀:可能是金属离子或pH超限;建议添加EDTA(1–5 mM)或调整pH至6–8。

蛋白活性抑制:可能是浓度过高导致部分变性;建议降低至0.05%以下,或替换为Pluronic F-68。

 

备注:Tween 20的平衡性能使其成为诊断试剂开发的“万金油”成分,但需通过预实验(如溶血测试、蛋白活性分析)优化浓度与配方。若需更高去污力,可复配Triton X-100(0.01%-0.05%);若需更低溶血性,优先选择Tween 80或Pluronic F-68。

 

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