核酸释放剂NF-3,RPA冻干专用
品名 | 核酸释放剂NF-3,RPA冻干专用 |
类型 | 核酸原料 |
别名 | 免提核酸释放剂NF-3 |
形态 | 液体 |
产地 | 中国 |
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核酸释放剂NF-2/NF-3/NF-4可直接裂解释放样品核酸(DNA/RNA),无需核酸抽提,直接取混合液上清作为模板进行核酸PCR扩增或恒温扩增,且缓冲液对核酸扩增的酶有特异性保护。
核酸释放剂NF-2/NF-3/NF-4适用于所有临床样品(唾液、新鲜全血、血清、肺泡冲洗液、尿液、组织、环境)中细胞(真核、昆虫等)和病原体(病毒、支原体、衣原体、细菌等)采集后的高效灭活。
混合液无需再抽提核酸,可直接取上清作为模板进行PCR或者恒温扩增检测。扩增效率较核酸抽提核酸后核酸扩增效率低2~4个Ct值,释放核酸后进行荧光PCR检测的灵敏度可达5个细胞,约500~1000copies/mL。
可常温长时间保存释放出的病原体核酸,其中常温保存释放出的RNA 7天不降解,常温保存释放出的DNA 90天不降解。
不同样本的释放步骤
1.血清、血浆、唾液、稀痰液、尿液、非PBS拭子、非胍盐采集液、细胞培养液等液体样本
① 取释放剂 250μL置于1.5mL离心管内,加入液体样本50μL,反复吹打混匀2-5次,室温(22~25℃)放置作用≥5min。(推荐使用比例:释放剂比样品5:1)
② 若是新鲜全血,则取10μL全血,加入150μL 释放剂中,反复吹打混匀2-5次,室温(22~25℃)放置作用≥5min。(推荐使用比例:释放剂比样品15:1-10:1)
2.EDTA抗凝血样本、完全溶血样本、浓痰液、腹水样本、高浓度PBS溶液样本,
需要先用DEPC水10倍稀释,再按释放剂比液体样本5:1进行释放,如取稀释10倍后的样本50μL,再加入释放剂 250μL,混合后室温放置静止作用≥5min。
3.组织固体样本
取释放剂 500μL置于1.5mL离心管内,再加入黄豆大小充分剪碎的组织样品,反复吹打混匀3-5次,室温(22~25℃)放置作用≥5min。
注意:亦可加入生理盐水组织匀浆后上清液,按照液体样本进行操作。
释放剂NF-3/NF-4冻干型扩增取样
直接取采样管上清25~50μL作为冻干型RPA、PCR或LAMP扩增模板,进行RPA、PCR或LAMP检测。
注意:取模板的体积应为冻干体系所需要的总体积,即25μL的冻干反应体系加入采样管上清为23μL,50μL的冻干反应体系加入的采样管上清为45μL。
货号 | 规格 | 价格 (元) | 数量 |
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BNF003 | 300次 | 1480 |