语言:中文English

DNA/RNA通用型转染试剂

Braveds
概述

是一款高性能、高品质的通用型基因转 染试剂,既可用于传送质粒DNA,又具有较强的RNA转染能力。与其 它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单 易行、重复性好等优点。

可适用于众多较难转染细胞株 的质粒DNA/siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较 难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到较高的转染 效率,且重复性好。

质粒DNA的转染:

以24孔板步骤为例

1.细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度

2.DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA(或15pmol siRNA) 加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL

3.转染试剂稀释: 取1μL的DNA/RNA通用型转染试剂加入到9μL的 Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL

4.复合物制备:将上述质粒DNA(或siRNA)稀释液和转染 试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟

5.将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继 续培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基

siRNA的转染:

 转染步骤与DNA相同,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达 水平和低细胞毒性。

质粒DNA和siRNA的转染优化:

可通过改变细胞密度、DNA/siRNA浓度以及DNA/RNA通用型转染试剂浓 度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,DNA/RNA通用型转染试剂(µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整;DNA/RNA通用型转染试剂(µL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。

不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量

培养板

单孔面积

接种培养基

Opti-MEM稀 释后终体积

DNA转染

siRNA转染

试剂用量

DNA

试剂用量

siRNA

96孔板

0.3cm2

200ul

10ul

0.4ul

0.2ug

0.5ul

7.5pmol

24孔板

2.0cm2

500ul

20ul

1.0ul

0.5ug

1.0ul

15pmol

12孔板

4.0cm2

1ml

40ul

2.0ul

1.0ug

2.0ul

30pmol

6孔板

10.0cm2

2ml

100ul

4.0ul

2.0ug

4.0ul

60pmol

60mm

20.0cm2

5ml

0.2ml

8.0ul

4.0ug

8.0ul

120pmol

10cm

60.0cm2

15ml

0.6ml

24.0ul

12.0ug

24.0ul

360pmol

 

 

加入购物车
货号 规格 价格 (元) 数量
BLDR003 0.1ml 560
BLDR003 1.5ml 2200
BLDR003 5*1ml 6300