DNA/RNA通用型转染试剂
品名 | DNA/RNA通用型转染试剂 |
类型 | 转染试剂 |
形态 | 液体 |
产地 | 中国 |
保存条件 | 2-8度 |
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是一款高性能、高品质的通用型基因转 染试剂,既可用于传送质粒DNA,又具有较强的RNA转染能力。与其 它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单 易行、重复性好等优点。
可适用于众多较难转染细胞株 的质粒DNA/siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较 难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到较高的转染 效率,且重复性好。
质粒DNA的转染:
以24孔板步骤为例
1.细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
2.DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA(或15pmol siRNA) 加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
3.转染试剂稀释: 取1μL的DNA/RNA通用型转染试剂加入到9μL的 Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
4.复合物制备:将上述质粒DNA(或siRNA)稀释液和转染 试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟
5.将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继 续培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基
siRNA的转染:
转染步骤与DNA相同,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达 水平和低细胞毒性。
质粒DNA和siRNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、DNA/siRNA浓度以及DNA/RNA通用型转染试剂浓 度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,DNA/RNA通用型转染试剂(µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整;DNA/RNA通用型转染试剂(µL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之间调整。
不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量 |
|||||||
培养板 |
单孔面积 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀 释后终体积 |
DNA转染 |
siRNA转染 |
||
试剂用量 |
DNA |
试剂用量 |
siRNA |
||||
96孔板 |
0.3cm2 |
200ul |
10ul |
0.4ul |
0.2ug |
0.5ul |
7.5pmol |
24孔板 |
2.0cm2 |
500ul |
20ul |
1.0ul |
0.5ug |
1.0ul |
15pmol |
12孔板 |
4.0cm2 |
1ml |
40ul |
2.0ul |
1.0ug |
2.0ul |
30pmol |
6孔板 |
10.0cm2 |
2ml |
100ul |
4.0ul |
2.0ug |
4.0ul |
60pmol |
60mm |
20.0cm2 |
5ml |
0.2ml |
8.0ul |
4.0ug |
8.0ul |
120pmol |
10cm |
60.0cm2 |
15ml |
0.6ml |
24.0ul |
12.0ug |
24.0ul |
360pmol |
货号 | 规格 | 价格 (元) | 数量 |
---|---|---|---|
BLDR003 | 0.1ml | 560 | |
BLDR003 | 1.5ml | 2200 | |
BLDR003 | 5*1ml | 6300 |