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DNA专用转染试剂

Braveds
概述

是一款性能优良的DNA转染试剂,可用于 质粒DNA的胞内递送和基因表达。它具有较强的DNA转染能力,与其 它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单 易行、重复性好等优点。

剂可适用于众多易转染细胞株的质 粒DNA转染、瞬时转染及稳定转染细胞的构建。适用于多种贴壁细胞 系,特别适用于各种常规细胞如HeLa、293T、COS7、CHO和 B16F10等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。

质粒DNA的转染:

以24孔板为例,步骤如下:

1.细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度

2.质粒DNA稀释: 将0.5µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基 中,稀释后的终体积为10µL

3.转染试剂稀释: 取1μL的DNA专用转染试剂加入到9μL的 Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL

4.复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液 混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟

5.将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继 续培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基

质粒DNA的转染优化:

可通过改变细胞密度、DNA浓度以及DNA专用转染试剂浓度对转染 进行优化。保证细胞融合度在60%以上,DNA专用转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。 

 

不同培养板所需转染试剂和DNA的用量

培养板

单孔面积

接种培养基

Opti-MEM稀 释后终体积

DNA转染

试剂用量

DNA

96孔板

0.3cm2

200ul

10ul

0.4ul

0.2ug

24孔板

2.0cm2

500ul

20ul

1.0ul

0.5ug

12孔板

4.0cm2

1ml

40ul

2.0ul

1.0ug

6孔板

10.0cm2

2ml

100ul

4.0ul

2.0ug

60mm

20.0cm2

5ml

0.2ml

8.0ul

4.0ug

10cm

60.0cm2

15ml

0.6ml

24.0ul

12.0ug

 

 

 

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