体内专用转染试剂
品名 | 体内专用转染试剂 |
类型 | 转染试剂 |
形态 | 液体 |
产地 | 中国 |
保存条件 | 2-8度 |
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是一款体内专用型基因转染试剂,可通 过尾静脉注射的方式将基因传送至肿瘤部位。与其它体内转染试剂相 比,具有操作简便、体内毒性低、稳定性好、体内循环时间长、靶向 性好等优点。
可适用于众多动物肿瘤模型。 可携带荧光标记基因、治疗基因等到达肿瘤部位,并在肿瘤部位蓄积 和表达。特别适用于各种常规肿瘤模型如HeLa、B16F10、MCF-7、 MDA-MB-231和A549等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
体内转染方法:
以体重为20g的荷瘤鼠为例,步骤如下:
1.试剂准备: 首先取20µL 体内专用转染试剂放置于样品管中
2.复合物制备: 取40µL的质粒DNA(DNA浓度为0.5µg/µL) 或siRNA(1.5nmol)与上述转染试剂进行复合
3.室温静置20分钟
4.补加葡萄糖注射液: 取140µL的葡萄糖注射液加入到上述 复合物溶液中
5.通过尾静脉注射的方式,注射于鼠体内,24~48小时后检 测基因在肿瘤部位的蓄积或表达
体内转染条件的优化:
可 通 过 改 变 肿 瘤 体 积 的 大 小 、 基 因 的 用 量 和 浓 度 以 及 体内专用转染试剂浓度对体内转染进行优化。保证肿瘤体积在 50mm3~200mm3最佳,体内专用转染试剂(µL): DNA(µg)可以在 2:1和0.5:1之间调整;体内专用转染试剂(µL): siRNA(nmol)可以在 10:1和20:1之间调整。根据小鼠体重的不同,葡萄糖注射液的补加体 积可以在推荐量±30µL之间调节。瘤内基因蓄积建议在注射后24小时 检测,瘤内基因表达建议在注射后48小时检测。
不同体重鼠的体内转染用量 |
||||||
鼠体重 |
建议瘤体积 |
葡萄糖注射液稀释后终体积 |
DNA推荐用量 |
siRNA推荐用量 |
||
试剂用量 |
mRNA |
试剂用量 |
siRNA |
|||
15g |
100mm3 |
150ul |
15ul |
15ug |
15ul |
1.2nmol |
20g |
100mm3 |
200ul |
20ul |
20ug |
20ul |
1.5nmol |
25g |
100mm3 |
250ul |
25ul |
25ug |
25ul |
2.0nmol |
30g |
100mm3 |
300ul |
30ul |
30ug |
30ul |
2.4nmol |
货号 | 规格 | 价格 (元) | 数量 |
---|---|---|---|
BLDR006 | 0.1ml | 560 | |
BLDR006 | 1.5ml | 2200 | |
BLDR006 | 5*1ml | 6300 |