悬浮细胞专用转染试剂
品名 | 悬浮细胞专用转染试剂 |
类型 | 转染试剂 |
形态 | 液体 |
产地 | 中国 |
保存条件 | 2-8度 |
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是一款专用于悬浮细胞转染的DNA转染 试剂,可用于质粒DNA在悬浮生长细胞中的传送。它适用于大规模蛋 白生产,及工业化生产中的真核细胞转染。具有不受血清影响、毒性 低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
适用于293F和CHO-S等悬浮 细胞的转染。在有血清和无血清的条件下,均可得到较高的转染效率, 且重复性好。在大规模蛋白生产中,操作简单、蛋白表达量高、细胞 毒性低、细胞通用性好。
质粒DNA的转染:
以100mL培养瓶为例,步骤如下:
1.细胞接种: 0.2~0.5×106/mL个细胞,接种于20mL培养基 中,在37℃,120rpm,5%CO2 的条件下培养
2.质粒DNA稀释: 将10µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基 中,稀释后的终体积为50µL
3.转染试剂稀释: 取20μL的悬浮细胞专用转染试剂加入到30μL的 Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为50µL
4.复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液 混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟
5.将上述100µL复合物加入到细胞培养瓶中,继续摇动培养 培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基
质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及悬浮细胞专用转染试剂浓度对转染 进行优化。悬浮细胞专用转染试剂 (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。 转染大于48h后,可通过适量添加培养基的方式延长转染时间。
不同培养瓶所需转染试剂和DNA的用量 |
|||||
培养瓶 |
细胞数量 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀 释后终体积 |
DNA转染 |
|
试剂用量 |
DNA |
||||
50mL |
0.5×106/mL |
10mL |
50ul |
10ul |
5ug |
100mL |
0.5×106/mL |
20mL |
100ul |
20ul |
10ug |
250mL |
0.5×106/mL |
50mL |
200ul |
50ul |
25ug |
500mL |
0.5×106/mL |
100mL |
400ul |
100ul |
50ug |
1L |
0.5×106/mL |
200mL |
2ml |
200ul |
100ug |
5L |
0.5×106/mL |
1L |
4ml |
1ml |
500ug |
货号 | 规格 | 价格 (元) | 数量 |
---|---|---|---|
BLDR007 | 0.1ml | 500 | |
BLDR007 | 1.5ml | 2000 | |
BLDR007 | 5*1ml | 6000 |