S25表面活性剂SPAN 60

脱水山梨(糖)醇单硬脂酸酯，商品名乳化剂Span-60（S-60）。HLB值4.70，米黄色块状固体。无臭、无毒。能分散在热水中，可溶于热的乙醇、苯，微溶于乙醚或石油醚。具有较强的乳化、分散和润湿能力。与各类表面活性剂有良好的配伍性能。属非离子型表面活性剂。

作用机制

乳化与稳定作用

HLB值特性：HLB值4.7，属低HLB非离子型表面活性剂，优先形成W/O型乳液（油包水），通过降低油水界面张力，在检测体系中稳定乳液分层。

增溶与分散：增强脂溶性成分（如某些化学发光底物或有机溶剂）在水相中的分散性，防止沉淀。

润湿与渗透促进

改善微孔板、载玻片等基材的润湿性，减少液体铺展阻力，提升试剂流动均匀性。

可辅助抗体或抗原从样本中释放（如细胞裂解前的预处理）。

配伍兼容性

与阳离子、阴离子及两性离子表面活性剂均有良好相容性，可通过复配调节HLB值，优化体系稳定性。

应用场景

免疫层析与ELISA

封闭液/稀释液：改善抗体在微孔板表面的均匀分布，减少边缘效应。

乳化型试剂：用于稳定含脂质抗原或抗体的复溶液（如某些病毒检测中的乳胶颗粒包被）。

化学发光检测

分散脂溶性发光底物（如鲁米诺衍生物），提高其在反应液中的溶解度及发光效率。

分子诊断

核酸提取：辅助裂解细胞膜，促进DNA/RNA释放（需验证浓度对核酸完整性的影响）。

LAMP/PCR反应：消除气泡干扰，稳定反应体系。

微孔板预处理

作为润湿剂，减少液体挂壁现象，提升加样精度。

常规浓度范围

乳化体系：0.5%-5%（需根据油相比例调整）。

封闭液/稀释液：0.1%-1%。

核酸提取：1%-3%（需实验验证对目标核酸的影响）。

溶解方法

固体溶解：先加热至60℃以上（可溶于热水或热乙醇），搅拌至完全溶解后缓慢冷却。

预混储存：建议配制高浓度储备液（如10% Span-60溶液），使用时按需稀释。

注意事项

储存条件

密封避光保存于干燥环境，避免吸潮结块。

长期存放可能出现轻微分层，使用前需摇匀。

实验条件控制

温度敏感性：高温（>80℃）可能导致部分失活，建议配制时控温。

pH兼容性：pH 5-9范围内稳定，强酸/强碱条件易水解失效。

材料相容性

塑料容器：长期接触可能导致聚乙烯（PE）或聚丙烯（PP）容器溶胀，建议短期使用或改用玻璃/不锈钢容器。

蛋白干扰：过量可能吸附于抗体或抗原，需通过预实验优化浓度。

泡沫控制

低HLB值可能导致起泡，可通过添加少量消泡剂（如硅酮类）或低温操作缓解。

常见问题（FAQ）

Q：为何SPAN 60在免疫层析中常用作封闭液？

A：其温和的乳化能力可均匀包裹微孔板表面，减少非特异性结合位点，同时不破坏抗体活性。

Q：能否直接替代Triton X-100用于细胞通透？

A：不建议，因SPAN 60主要功能为乳化而非破膜，Triton X-100的脂质溶解性更强。

Q：使用Span-60后出现浑浊如何处理？

A：可能是油相比例不当或温度过低导致，需调整HLB值（如复配吐温80）或升温至溶解温度。

Q：Span-60是否会影响化学发光信号强度？

A：合理浓度下无显著影响，但过量可能吸附发光物质，需通过实验确定最佳添加量。

Q：能否与强阳离子表面活性剂（如十六烷基三甲氧硅烷）共用？

A：可能因电荷中和导致沉淀，建议避免直接混合。