金标假阳，能补救吗？对于这个问题，答案是肯定的。对假阳性结果诊断的补救措施有一下方法，希望能帮助大家！

无论偶而还是重复出现假阳性结果，采用对于此类问题的诊断的一套系统的方法也是为了实施最恰当的补救措施。最明显的原因首先是被注意到的，主要有金标与捕捉抗体的反应、特异性电荷吸引力、疏水作用力和金-硫结合力。

然后应当注意在抗体、特殊样品特性和跨膜流动特性的非特异性交叉反应。 使用对照能够迅速地找到问题的根源。

下面是系统的诊断方法的说明和前面所列的可能原因的参考。当采用任何系统的诊断方法时，采用对照时，只能改变一个参数。采取这种方式，可以采取排除法。下面的问题可能会有些帮助：

1、是电荷的原因吗？检测体系 pH 值的变化（pH5-11）表明了正电荷是否存在和胶体金颗粒与捕捉抗体是否结合。

2、是疏水作用力的原因吗？这可能发生在固相中，捕捉抗体区或金标区。改变体系中活性剂浓度对于疏水作用是否是主要因素可以提供头绪。

3、是金-SH吸引的原因吗？最有可能发生在捕捉抗体带和样品浸入带中的半胱氨酸和精氨酸的基团中。如下面部分的描述对这两个区域的仔细检查可以揭示出问题的所在。

对于假阳性问题解决的系统方法：

对于快速检测试纸条应用的大多数检测手段来说，一般只是采用一个测验条（或者是“半条”）。没有必要选择完全干燥的检测条。在检测的过程中，硝酸纤维素膜直接被放置于含有金标液、样品和化学药品的微孔中，化学药品正常被放在干燥箱里。以这种方式，可以迅速简便地进行几种检测，并且不需要全装配装置和干燥箱。然而，如果由于干燥步骤而引起许多问题，那么在检测之前必须进行完全装配。

这些关于系统方法的问题可以被划为下面与检测装置和元件相关的五个目录中。

产生的问题是与金标液相关吗？

这个问题很好解决，换一种金标液就可以了——举例来说，在相同浓度和相同的pH值下用BSA-gold替换最初的金标液。如果问题还是没有消除，那么最为可能的原因是所带的电荷效应。如果换了金标液后不再产生假信号，那么问题产生的原因最可能是最初的金标液的问题或者是标记抗体的问题。在这里其他的对照是相似的金标液和含有单克隆抗体和多克隆抗体的金标液。在市场上也有可用于此类检测的许多金标液。

下面是一个由于金标液而产生的假阳性信号的例子。应用的是针对于临床样品（血清）检测传染性疾病的检测条。在所有的非阳性样品中都看到了假阳性结果。当使用BSA-gold金标液后，假阳性信号消失了。而使用了另一种非特异性金标液后，假阳性信号也消失了。然而，当更换了非临床对照样品，PBS在pH7.2下，使用特异性金标液假阳性信号仍然存在，在使用其它的金标液则没有假阳性信号。改变缓冲液的pH值为10后，减少了假阳性信号的发生，但是并没有消除假阳性信号。因此我们可以得出结论，问题的产生与样品或捕捉抗体无关，而是与对捕捉抗体席一行的高灵敏度的金标液。这些金标很可能含有裸金颗粒，这可能与捕捉抗体发生结合。使用新的金标液并且小心制备金标可以消除假阳性信号。

是捕捉抗体的原因吗？

在这种情况下使用的对照是相似的捕捉抗体或其它种类的抗体。然而在使用这些对照前，剥去BSA捕捉蛋白可以说明是不是其它地方产生的问题。也有可能不是由于抗体本身而产生假阳性信号，而是由于在抗体中的一些保护剂的原因。在这种情况下，在适宜的缓冲液（例如10mmolPO4）中进行透析可以改善情况。如果用了其它的抗体假阳性信号消失了，那么显而易见是特异性捕捉抗体引起了假阳性信号，采取的措施是更换抗体或者清除它。举个例子，在实际操作中，兔的单克隆抗体有时会产生这种情况，这主要是由于疏水力的作用，需要采用特别的方法来处理。

检测尿中的ßhCG的妊娠试验中对于所有样品都发现假阳性信号，无论这些样品本身是阳性还是非阳性。改变pH值没有消弱信号，更换金标液也没有作用。甚至在使用PBS缓冲液对照样品也没有消除信号。

问题很可能是由于捕捉抗体引起的。剥去捕捉抗体带用BSA代替后所有的信号都消除了。在10mmol的PO4中透析最初的捕捉抗体后，最终的结果符合样品的实际情况。综合以上情况，我们可以得出结论：这些抗体曾经悬浮于含有SH成分的缓冲液（譬如硫柳汞）中，我们要消除或者避免这些因素。

是膜的问题吗？

任何检测带的开发中最重要的过程是选择合适的膜。有些膜与其它的膜相比而言可能只适于特定类型的检测或者只适合于特定的样品。开发商应当有所有厂家的各种膜并且有各种孔径的膜，这样才能做出迅速的比较。举例来说，在干燥的过程中膜的疏水性是显而易见的，因此我们可以清楚的知道这批次的膜会产生随机的假阳性信号。

在选择快速检测技术所用的膜时不仅应当考虑到所要求的流速和蛋白结合特性，而且要考虑到在制备过程中膜的均质性。在这里需要用的对照是不同孔径和不同来源的膜，还有就是同一批次的膜的不同区域。

最初的试验的开发的目的是在实验室设计阶段时不会产生假阳性或假阴性结果。只有进行全部测试合格后决定检测技术可以转移到生产设计阶段。

当成比例扩大至几千个装置来进行检测条的组装过程时，无论如何，我们都应当在每一批次的生产过程都要记录很多随机产生的假阳性结果。调整pH值、使用另一种金标液和对捕捉抗体进行两次检查都不能立即揭示假阳性产生的原因。重新在小规模的实验室设计阶段进行测试，由于假阳性结果的产生是在无c带时发生的，因此可以说明假阳性结果产生的原因是由于硝酸纤维素膜。

对于实验室设计研究，只是用了小批次的膜。这么小的量的结果并不能说明是否符合大规模的生产。已经发现了大批次的膜有明显的疏水区（例如，没有正常湿润的区域），这些疏水区会引起胶体金颗粒与捕捉抗体发生非特异性结合。

是化学药品的原因吗？

在快速检测带的组装过程中，金标液和固相支持物（膜、结合垫或样品垫）可能用化学试剂预先处理过。所加的化学试剂可以包括盐、活性剂、蛋白质、糖和聚合物。一些化学物质能够提高假阳性的几率。

在针对血清中动物蛋白的研究用的检测带的开发中，会发生一些假阳性结果。在实验室设计阶段，在应用检测带之前，通过向血清样品和金标液中加入制备缓冲液后，然后再将检测带浸渍在微孔里来开始进行检测。更换金标液没有效果。改变缓冲液的酸度并没有影响到结果。再换捕捉抗体也没有消除随机发生假阳性结果。

此时用非阳性血清样品，在浸渍与血清样品之前，只有当缓冲液已经加入到血清样品几分钟后，才会观察到假阳性结果的出现。缓冲液中含有5%的强活性剂。降低活性剂的浓度至1%后，然后让血清和胶体金颗粒与缓冲液混合几个小时，此时没有观察到任何假阳性结果。这说明了过量的活性剂会强作用胶体金颗粒，会去除颗粒表面的抗体并且产生裸金颗粒，从而使其与捕捉抗体互相作用。

是样品的原因吗？

由于酸度、样品污染、或孕尿翳含量等诸如此类的因素的变化，正如前所述，样品能够引起不可预知的假阳性信号。为了确定是否是样品的原因，需要检测很多不同的样品，其中包括类似的样品，也包括不同来源的样品。除了样品的生物物质量或有机物量外，问题也可能存在于所使用的缓冲液。如果是这个原因，需要用另一种缓冲液作对照。最简单调整的方式是改变样品的酸度，这种方法可以很快确定是否是样品中电荷吸引力的作用而产生的问题。也可能需要对样品进行过滤，过滤得步骤可以独立于检测程序，也可以作为检测步骤的一部分而使用。在生产开发中采用针对于尿液中激素的快速检测技术对大量不同的尿液样品进行检测，其特异性可以达到97%，而其灵敏度可以达到98%。然而，在以后的测试阶段发现从储藏的样品中发现几例假阳性结果。

在对这些样品的酸度的测量后发现酸度有所提高，但是经过等酸度水平的对照缓冲液样品检测后可以排除酸度的影响。当对尿液样品进行过滤后没有产生假阳性结果。然后进行显微镜观察后发现样品的细菌污染是产生假阳性的主要原因。这样，我们可以得出结论细菌含量的增加会提高样品的疏水性，这会引起胶体金颗粒和捕捉抗体的非特异性作用。新鲜的样品不会产生类似的问题。